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嘔吐毒素免疫親和柱是如何進(jìn)行樣品處理的?

更新時(shí)間:2022-11-30點(diǎn)擊次數(shù):1105
  嘔吐毒素,又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實(shí)中, 對(duì)人體有一定危害作用,歐盟分類標(biāo)準(zhǔn)為三級(jí)致癌物。嘔吐毒素免疫親和柱通過嘔吐毒素抗原與抗體的特異性結(jié)合,將毒素從樣本中選擇性分離,從而達(dá)到凈化的效果。那么對(duì)于嘔吐毒素免疫親和柱的樣品是如何進(jìn)行處理的呢?下面我們來詳細(xì)了解下!
 
  嘔吐毒素免疫親和柱的樣品處理:
  方法一:酒類
  取脫氣的酒類樣品加入聚乙二醇8000,用PBS緩沖液定容;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
 
  方法二:醬油、醋、醬及醬制品;
  取樣品,加入聚乙二醇8000,用PBS緩沖液定容;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
 
  方法三:糧食及飼料
  1.玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補(bǔ)料等吸水性較小的樣本;
  稱取粉碎樣品,聚乙二醇8000,加入蒸餾水;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
  2.麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強(qiáng)的樣本;
  稱取樣品,聚乙二醇8000,加入蒸餾水;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
 
  注意事項(xiàng):
  1.使用前,免疫親和柱需回至室溫(22~25℃)。
  2.親和柱2~8℃儲(chǔ)存,不得凍存。
  3.不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
  4.取樣量:根據(jù)需要可以適當(dāng)增加或減少取樣量,注意提取液量要相應(yīng)改變。
  5.pH:親和柱的上樣溶液pH需在6~8之間,若偏離此范圍需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
  6.由于樣本中嘔吐毒素的含量普遍較高,如果計(jì)算后樣本含量大于4mg/kg時(shí),表示已經(jīng)超過親和柱柱容量,需要適當(dāng)降低上樣液的體積,重新檢測(cè)。
  7.上機(jī)檢測(cè)時(shí)的溶劑與流動(dòng)相保持一致可以消除溶劑效應(yīng)的影響。
  8.嘔吐毒素可致癌,應(yīng)戴手套操作。
  9.使用過的容器及標(biāo)準(zhǔn)品溶液最好用次氯酸鈉溶液(5%V/V)浸泡過夜。

 

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